实验室无菌操作规章制度.doc

　实验室无菌操作规章制度

　 导语：实验室里对于环境要求很高，而且一些实验也会被细菌影响，下面我整理了实验室无菌操作规章制度，欢迎大家阅读!

　 实验室无菌操作规章制度

　 1.洁净区内器械消毒灭菌要求

　 1.1 无菌区外的器械清洁消毒

　 1)配平天平：每周至少消毒 1 次，表面用蘸 84 消毒液的无尘纸擦拭，再用 75%医用酒精擦拭。

　 2)台式冷冻离心机内腔及适配器：每日操作结束时用 75%医用酒精对离心机内腔以及适配器内外表面进行充分消毒，并整齐摆放于实验台晾干备用。

　 3)光学显微镜及倒置显微镜：每周对显微镜至少清洁消毒 1 次，用无尘纸擦拭显微镜台面及外表面，用镜纸蘸 95%乙醇擦拭镜头和目镜。

　 4)疫苗箱洗涤消毒：对于用过的疫苗箱应每天用配制的 84 消毒液浸泡过夜，再用自来水冲洗表面，无尘纸擦拭箱内表面。

　 1.2 无菌操作区内的器械清洁消毒

　 1)手动移液器消毒：手动移液器表面应每周用 75%医用酒精清洁消毒，将手动移液器吸头取下，更换过滤膜后再装上吸头;将手动移液器放于试验台充电，充电并消毒后放回无菌操作台原位，使用前还应开启无菌台内紫外消毒 30min。

　 2)剪刀、镊子、止血钳及不锈钢器械：不锈钢器械每处理一份标本都应更换，使用过的器械应用戊二醛浸泡 2h，此后用自来水冲洗至少 20 遍，再用去离子水冲洗 3 遍，用纱布擦干后经包布包裹放入干净的消毒盒中，贴上灭菌标签并标记日期，采用湿热灭菌 1℃/30min，灭过的器械放洁净储物箱备用。

　 3)无菌枪头的灭菌消毒：无菌枪头至少每周灭菌 1 次，戴 PE 手套将待灭枪头装入枪头盒，盖好后用灭菌胶带封口并标注日期后，进行湿热灭菌，灭菌完成后放烘箱烘干，经传递窗放入洁净区待用。

　 2 操作过程的无菌操作要求

　 2.1 无菌操作要求

　 1)无菌操作时应穿无菌洁净服、戴口罩、鞋套、手套，进入无菌操作区前

　对手套，手腕、前臂、胸部等部位的洁净服进行 75%酒精消毒;无菌操作过程中应每隔 15min 对手套，手腕、前臂、胸部等部位的洁净服进行 75%酒精消毒。

　 2)无菌操作中应减少进入洁净室的人员数量;无菌操作中，操作人员应注意力集中，不可

　 与其他人员交谈(工作需要除外);非操作人员应尽量远离无菌操作区(学习、培训除外)，严禁在无菌操作区附近做大幅度动作，大声讲话，走来走去;打喷嚏、咳嗽应立即前往缓冲间处理，并对洁净服进行全面消毒，方可进入洁净室。

　 3)物料、器械进入无菌操作区前应用 75%医用酒精充分消毒，开启紫外照射 30min(严禁紫外照射的物料除外)，方可在无菌操作区中使用。

　 4) 无菌物品应定期消毒并有明确的灭菌标识，保证在灭菌有效期内使用，超有限期的物品应重新清洁灭菌后使用。

　 5) 无菌操作过程中，发生手套破损，应立即更换手套，对手套进行消毒，并对可能出现污染的物料及器械进行更换;如发现无菌物料包装出现破损，应立即更换包装完好的无菌物料，做消毒处理后使用，出现破损的无菌物料做废弃处理;操作过程中，无菌器械被污染(掉落地面、接触非无菌物品等)，应立即移出无菌操作区，取备用无菌器械使用。

　 6)在操作 CO2 培养箱时，应严格按照 CO2 培养箱使用标准操作规程操作，并用 75%医用酒精对手部、双臂、胸部、头部等部位进行充分消毒，然后在进行开箱操作;培养结束后，应用消毒剂对 CO2 培养箱进行全面清洁消毒，并定期用紫外照射 30min，以免培养箱染菌。

　 7)操作完成后，应立即对无菌操作区进行清场，清除操作产生的垃圾，并对操作台进行全面清洁消毒，并紫外照射 30min;器具应用 75%医用酒精充分清洁消毒，摆放整齐;剩余物料应放回储物箱，摆放整齐，盖上储物箱。

　 8)质保员负责定期对实验室清洁消毒效果进行取样验证，实验室负责对不合格区域进行重新清洁消毒，直至检测合格。

　 2.2 无菌物品打开程序

　 1)经过灭菌的无菌物品包括消毒盒和消毒包，应经无菌操作打开;开启前应对手套充分消毒，用 75%医用酒精喷遍每个手套及与手套接触的洁净服袖口。

　2)消毒盒应在无菌工作台中心位置开启，开启时注意不能用手或衣袖触碰消毒盒内侧任何部位，拿取盒内物品时必须用消毒过的镊子并夹在无菌器具的手持部位，用过的器具不得再次放回无菌盒。

　 3)消毒包应在洁净区物品使用处，开启时应查明消毒日期，将消毒包逐层打开，注意不能用手或衣袖触碰消毒包内侧任何部位，消毒一旦打开不应再次包裹领取他用。

　 2.3 开启试剂瓶、装液袋的无菌操作程序

　 1)试剂瓶开启前要用 75%医用酒精充分消毒，先用酒精棉球清除表面浮尘，再用洁净棉球从瓶盖与瓶口接触处开始消毒，将整个瓶盖和瓶口下 2cm 都进行消毒;如有保护外盖应首先用剪刀或镊子移除，然后用酒精棉球清除附着的残留碎屑，再用酒精充分消毒;如非首次开启使用口的试剂瓶，也应对瓶口和瓶盖进行酒精消毒方可打开。

　 2)瓶口消毒后，用无菌镊子取下瓶盖，并使瓶盖内口朝上放于无菌台安全位置;如开启后试剂剩余大量，需再次消毒瓶口和瓶盖，盖好后采用无菌封口膜密封，并标注使用日期和使用人，放 4℃冰箱留下次用。

　 3)装液袋(血袋或细胞输注袋)应直立放置在洁净操作台安全区，尽量在密闭条件下进行液体转移，需要打开时应先充分消毒;对待开启部位上下 2cm 处先用碘伏消毒，再用酒精消毒，最后用无菌剪刀将导管剪开或用针头穿刺取得袋中液体。

　 2.4 无菌液体转移操作程序

　 1)无菌液体转移应在密闭或尽可能少的敞口开放的时间的情况下进行，转移前应对接口部位充分消毒，液体试剂使用后需要保存的，应消毒后密封并标注使用日期和使用人。

　 2)需要开放转移的液体，应采用电动移液(分液)器和一次性无菌移液管操作，取下的瓶盖应使瓶盖内口朝上放在正前方的安全区域，操作中应尽可能避免手或手臂干扰敞口容器上方气流。

　 3 其他说明

　 上述无菌操作管理要求，已在相关的设备及制备工艺操作规程中有部分体现，应结合实际操作执行。

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