有关酶的生物化学实验改进
摘 要：针对生物化学实验中有关酶促反应实验项目的一些问题和不足，进行了系统的分析并提出了解决问题的方案，最后对生物化学实验课程的改革提出了几点建议，旨在提高实验教学效果。
关键词：生物化学实验；酶；实验教学；改进
中图分类号 Q547 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）21-28-03
生物化学实验中有关酶促反应的实验项目比较多，在实验开展的过程中存在着一些问题和弊端，需要及时的改进与更新。本文就有关酶促反应的生物化学实验做了系统的综述，对一些相关的常见问题做了分析并提出解决问题的方案，最后对生物化学实验这门课程提出了几点建议，旨在提高实验教学效果。
1 影响酶活力的因素
酶是一种活性蛋白质。因此，一切对蛋白质活性有影响的因素都影响酶的活性。酶与底物作用的活性，受温度、pH值、酶液浓度、底物浓度、激活剂或抑制剂等许多因素的影响[1]。现结合实验本身，就几个重要因素作补充说明。
1.1 温度 温度对酶活力的影响非常明显，因此要设定好适合的反应温度。酶促反应的温度跟实验对象有直接的关系，适合不同物种生长的环境温度大不相同，不能一概而论。例如，哺乳动物在37℃时，酶反应温和，而到了45℃以上就不能存活，37～45℃是酶促反应的加速阶段。最适温度是适合物种生长的温度，而对于实验本身，为了控制好反应时间和达到理想的实验效果，我们要考虑到一个最佳的实验温度。教材中普遍用的是最适温度而忽略了最佳温度的重要性，笔者认为最佳温度应高于但不应超过最适温度5℃为宜。
1.2 pH值[2] 酶促反应都有一个最适pH值，具体的说就是“在最适pH值左右一个很小的范围内，酶的活性很高，高于或者低于这个值，酶的活性都不高”。对于实验用的缓冲液，笔者认为有4点要求：（1）所用的化学试剂一定要买正规厂家的；（2）缓冲液配制时必须要定容；（3）缓冲液配制完要检测其pH值（最好用pH计）；（4）要让学生明白缓冲液稀释倍数不高的情况下，其pH不会发生明显变化。
1.3 激活剂或抑制剂 生物化学实验酶促反应最常用的激活剂如Mg2+、Cl-等，抑制剂如Cu2+等重金属离子，学生需要掌握并能灵活应用。
2 酶促反应实验的合理改进
表1例举出了生物化学实验中相关酶促反应的实验项目。一般来说，酶促反应实验项目的开展需要考虑以下几个方面因素。
（1）要考虑生物化学实验的总学时数和酶促反应实验所占的比例。
（2）基础型、应用型和综合型实验要比例得当。应用型包含了基础型，而综合型包含了前两者。提倡综合型实验项目的开展，因为它能够真正做到理论应用于实践。综合性实验更要提前设计好实验流程和控制好完成实验的时间。
（3）有关酶促反应的实验，植物生理实验中占比很大，而动物生理实验中基本没有，微生物实验中也占比较小（分子生物学实验中微生物材料占比较多），因此，无论是生命科学学院还是医学院，生物化学实验取材理应偏向于动物。
（4）每个实验项目要考虑有生物化学实验技能的运用，锻炼学生的基本实验技能和动手操作能力。如离心、层析、光谱、滴定、电泳技术等。
（5）摒弃过时的实验项目，不断改进和更新符合生物化学发展趋势的实验项目[3-5]。
（6）不同学校可根据实际情况和自身条件合理安排实验项目。
3 对生物化学实验改进的几点建议
随着生物化学学科的不断发展和分子生物学技术的日新月异，生物化学实验也需要与时俱进。以下意见和建议，仅供参考。
（1）生物化学实验有其自身的特点，生化试剂种类较多，实验结果难以预知，这就需要专业的有丰富经验的实验技术人员来准备实验。很多高校在这一点上做得很不够，导致实验结果不理想或者根本没有结果的不在少数。同时实验教师和实验准备人员要相互沟通和协调，提前设计好实验流程和完成实验的时间，保证实验顺利开展。
（2）所涉及的仪器很多，生物化学实验的指导教师和准备人员应具备基本的仪器操作技术和常规的维修保养能力。一些危险系数高的操作一定要慎重对待，避免事故的发生，如高温高压操作、离心操作、强电流操作等。
（3）实验的开出要考虑到：实验类型（基础型、应用型和综合型）的合理安排，提倡综合型实验的开展；实验材料选取比例得当（原则上动物占比较多）；常用的实验技能要有所涉及；不同的专业其实验项目要有区分度和侧重点。
（4）不断完善和更新实验项目[3-5，14]，及时摒弃一些过时陈旧的实验项目，与学科发展需要相适应。各院校相关专业要根据自身条件和实际情况作出合理安排。生物化学实验的目的旨在培养学生的动手操作能力和将理论知识应用于实践。
参考文献
[1]王镜岩，朱圣庚，徐长法.生物化学[M].北京：高等教（下转86页）（上接29页）育出版社，2002.
[2]黄敏，颜冰楠，桂新春.酶的pH影响实验中缓冲液配制的改善与优化组合[J].职业教育研究，2012（8）：136-137.
[3]许君臣，查岭生，李小平.脂肪酸的β-氧化实验改进研究[J].淮北煤炭师范学院学报：自然科学版，2010，31（1）：94-96.
[4]李志忠，刘俊，朱文君.酶的特性实验设计与方法的优化[J].甘肃高师学报，2000，5（2）：62-63，122.
[5]徐晓舒，肖仲久.“酶的特性” 实验方法的改进探索[J].遵义师范学院学报，2012，14（5）：107-108，119.
[6]张龙翔，张庭芳，李令媛.生化实验方法和技术（第二版）[M].北京：高等教育出版社，1997.
[7]袁道强，黄建华.生物化学实验和技术[M].北京：中国轻工业出版社，2006.
[8]郭蔼光，郭泽坤.生物化学实验技术[M].北京：高等教育出版社，2007.
[9]陈钧辉.生物化学实验（第四版）[M].北京：科学出版社，2008.
[10]赵永芳.生物化学技术原理及应用[M].北京：科学出版社，2008.
[11]魏群.基础生物化学实验（第三版）[M].北京：高等教育出版社，2009.
[12]张志良，瞿伟菁，李小方.植物生理学实验指导（第四版）[M].北京：高等教育出版社，2009.
[13]王秀奇，秦淑媛，高天慧，等.基础生物化学实验（第二版）[M].北京：高等教育出版社，2011.
[14]查岭生，胡鹏，吴晓敏，等.DNS法测定植物组织中还原糖及总糖含量实验的改进[J].安徽农学通报，2013，19（11）：16，26.
（责编：施婷婷）