小猪感染小袋纤毛虫腹泻的诊断与治疗
报告翻。已知（包括人）有33种动物能够感染小袋虫，其中人感染小袋虫病在临床上表现多为腹泻、腹痛、营养不良、里急后重和脱水等症状。人结肠小袋虫是通过污染的水源、环境卫生，以及通过与猪接触等途径而感染，特别是由猪的结肠小袋虫所引起的感染比较普遍。相关研究也表明猪的结肠小袋虫感染是人结肠小袋纤毛虫病的主要感染源，对人的危害极大，因此养殖场应该加强对猪的结肠小袋虫病的防治。
猪结肠纤毛小袋虫属纤毛虫纲、小袋科、小袋虫属。虫体较大，在发育过程中，有滋养体和包囊2种形态。滋养体呈卵圆形或梨形大小（30～150）μm×（25～120）μm。身体前端有一个倾斜的沟，沟的底部是胞口，向下连接一个管状构造，以盲端终止于胞浆，在显微镜下观察，有一个腊肠样的主核，位于体中部，其附近有一小核，胞浆内有空泡，全身覆有纤毛，纤毛多呈规律性摆动，因此虫体得以较快的速度向前做旋转运动，包囊多呈卵圆形，直径为40～60μm，其内有2层囊膜，并且包藏着1个虫体。该寄生虫的传播主要是猪采食了被包囊污染过的水及饲料后，囊壁在肠内被消化，囊内虫体逸出变为滋养体，从而进入大肠内寄生，以肠壁细胞、淀粉、细菌及白细胞为食物，以横二分裂法进行繁殖同。在一些不利的环境条件下，部分滋养体易形成包囊，随宿主的粪便排出体外。另外，滋养体也可以随宿主的粪便排出体外后，在外界形成包囊。2015年3月，龙岩市某猪场保育猪发生小袋纤毛虫引起的腹泻，通过采集仔猪腹泻的粪便在实验室检测，根据检测结果使用地美硝唑治疗取得满意的效果。现报告如下。
1材料与方法
1.1临床检查及样品采集
该猪场保育猪二栋，大约50～70日龄的仔猪460头，因气温骤降连续下雨导致部分仔猪出现拉稀，曾用环丙沙星、痢菌净、氟哌酸、庆大霉素等药物进行治疗十多天，均未取得好的效果。现场查看猪栏内卫生条件极差，舍内潮湿，仔猪身上被粪便污染，仔猪何况差，被毛粗乱，皮肤苍白，每个栏都有腹泻的仔猪，经统计腹泻的仔猪有30%左右。腹泻的粪便呈灰白色水泥样，稀软浆糊样（图1和图2），后期仔猪消瘦，行走摇摆，最终脱水衰竭而死亡。剖检4头腹泻消瘦的仔猪，主要见到肠道的病变为主，结肠和回肠内充满液体，肠黏膜弥漫性出血，肠系膜淋巴结肿大充血，切面外翻湿润，肠壁变薄，肠内有充血、出血，有溃疡灶。随即采集保育猪的新鲜粪便30份，装入密封袋中后编号，并马上送实验室检测。
1.2实验室检测
1.2.1饱和食盐水试剂的配制 将1000mL蒸馏水倒入搪瓷杯中，然后在电热炉上煮沸，加入大约400gNaCl，直到观察到食盐不再溶解出现沉淀为止，冷却后用纱布过滤，常温静置备用。
1.2.2检测器材 麦克马斯特计数板，光学显微镜，粪筛，移液管，胶头滴管，镊子，玻璃棒，盖玻片，载玻片，烧杯，纱布，漏斗，漏斗架，电子天平，量筒。
1.2.3检测方法 粪便采用直接涂片法、饱和食盐水漂浮法和沉淀法对该采集粪便进行猪小袋纤毛虫卵囊检测并计数。方法如下：
1）直接涂片法：在清洁的载玻片上滴1～2滴生理盐水，其上加少量粪便，用棉签仔细混匀，用镊子除去较大的渣子，加上盖玻片，将做好的玻片置于显微镜下观察虫卵或幼虫。
2）饱和食盐水漂浮法：称取2g被检粪放在小烧杯中，用镊子或玻璃棒压碎，加入10mL饱和盐水，搅匀，再加入50mL饱和盐水混匀，用粪筛过滤后，将滤液混匀后，用移液管将粪便加入麦氏计数板的2个计数室内，置计数板于显微镜载物台上，静置1～2min后，按顺序观察计数室内的虫卵或卵囊，按公式计算出被检粪便中的虫卵OPG值（每克粪便中的虫卵数）。计算公式：OPG=2个计数室内的虫卵或卵囊总数×150。
3）沉淀法：将被检粪便定量2g，用定量粪便3～5倍体积的水稀释，用铜筛网过滤，并用适量水边冲边洗边过滤。将滤液沉淀20min，弃上清液，在加水沉淀，重复3次，弃上清液，用量筒对该沉淀液定量（YmL）。充分摇匀沉淀液后，迅速将部分沉淀移至“计数器”的两个计数室内。在显微镜下，观察计数器两计数室内的寄生虫虫卵并计数。按以下公式计算EPG值。
计算公式：OPG=（计数器两个小方格内总的虫卵数×YmL）/（2g×0.2）
1.3检测结果
30份样本通过饱和食盐水漂浮法检测出22份样品中含有疑似猪结肠小袋纤毛虫包囊（图1）和滋养体（图2），其感染率高达73.33%，对这22份样本经麦克马斯特计数板计数包囊，其平均OPG值为2670，结果如表1所示。检测结果提示该猪场保育猪腹泻可能由猪结肠小袋虫感染引起。
1.4治疗措施
1.4.1加强饲养管理 提高舍内温度和做好舍内卫生，使用干粉消毒剂消毒以降低舍内湿度，饲料少给勤添保持新鲜。
1.4.2隔离治疗 把体况较差、腹泻严重的仔猪及时隔离，加强护理，每头仔猪灌服甲硝唑0.2g，2次/d，连用2d，根据栏内仔猪数在饮水中适量添加补液盐和磺胺氯达嗪钠。
1.4.3在饲料中添加药物 按照每吨饲料添加2.5kg的20%地美硝唑药物饲喂仔猪，连用7d。
1.5治疗效果和用药后粪便检测情况
采取上述治疗措施2d后腹泻仔猪明显减少，1周后基本康复，再次采集该猪场保育猪的新鲜粪便样本进行检测。方法同1.2.3结果30份中只有2份检出阳性，感染率6.67%，但其平均OPG值只有320，结果如表2所示。
2讨论
猪场小猪腹泻是猪场的常见病之一，导致腹泻的原因是多方面的，要认真检查，使用正确的检测方法，对症治疗才能取得采良好的效果。像本次腹泻猪舍内环境阴冷潮湿、没有及时清理粪便、卫生条件恶劣导致猪群抵抗力下降是其发病的外因，而猪小袋纤毛虫的感染是其内因。猪小袋纤毛虫等寄生虫病是猪场容易忽视的寄生虫病之一，多为隐性感染。猪寄生虫感染率高，死亡率低，猪场多呈亚临床感染状态，其致病作用更多是条件性的，疾病的发展过程中也是渐进式，缓慢式，用抗菌素治疗无效。所以当猪场发生腹泻疾病用抗菌素治疗效果不好时，除加强饲养管理措施外，要通过现场剖检、实验室检测等手段认真查找病因，对症下药才能取得良好的效果。本次实验检测结果表明，30份粪便中有22份检测出猪结肠小袋纤毛虫，平均其OPG值高达2670，说明感染率很高，加药治疗后不单腹泻症状得到了控制，小猪的采食量和体质基本恢复，而且用药后再次检测粪便，30份样本只有2份阳性，感染率降至6.67%，平均OPG值只有320，证实本次腹泻主要是由猪小袋纤毛虫引起的。
3小结
通过本次诊断、治疗实验表明：饱和食盐水漂浮法能有效检测猪小袋纤毛虫的感染；每吨饲料添加2.5kg的20%地美硝唑连用7d，对治疗猪小袋纤毛虫病效果明显。
（编辑：狄慧）
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