盐酸吗啉胍对植烟土壤酶活性的影响

材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要仪器。

SPH-2012C恒温振荡器（上海世平实验设备有限公司）、WFJ型721紫外分光光度仪（尤尼柯仪器有限公司）、人工气候箱（浙江杭州科力仪器仪表有限公司）、电子天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）、集热式恒温加热磁力搅拌器（河南巩义予华仪器有限责任公司）。

1.1.2 主要试剂。

盐酸吗啉胍标准样品由上海惠光科技有限公司提供；30%过氧化氢溶液、98%浓硫酸、0.10 mol/L高锰酸钾溶液（用草酸钠标定）、氢氧化钠溶液、8%蔗糖溶液、葡萄糖、甲苯、10%尿素、1.35 mol/L苯酚钠溶液、0.9%次氯酸钠溶液、硫酸胺、3，5-二硝基水杨酸、磷酸缓冲溶液（pH 5.5）、柠檬酸-磷酸缓冲溶液（pH 6.7）等，以上试剂均为分析纯。

1.1.3 供试土壤。试验土壤取自湖南农业大学耘园烟草基地的河潮土。土壤样品经自然风干后，人为去除土壤中的石粒、植物根系物等非土壤成分，研碎过20目筛后备用。供试土壤的理化性质如下：土壤有机质含量23.1 g/kg，pH 6.2，土壤粘粒、粉粒和砂粒含量分别为24.5%、48.3%和27.2%。

1.2 试验方法 将试验土壤过10目（2.0 mm）筛多次，直至均匀。用电子天平称取200.0 g已制备好的土壤样品若干份分别置于500 ml烧杯中，计算使试验土壤中盐酸吗啉胍的含量分别为0（CK）、1.0、10.0和50.0 mg/kg的量，用微量注射器在盐酸吗啉胍标准样品中取样并均匀喷洒于土样中（平行3次），整个过程用玻璃棒搅拌，喷完后，加入蒸馏水240 ml使土水重量之比为1∶1.2，再次用玻璃棒搅匀土水混合体，并记录最高液面。然后放入人工气候箱于（25±1）℃下培养，调节亮度使光暗周期为14∶10 h，培养过程中及时补充蒸馏水使液面保留在最高液面，平行试验3组。在培养的第1、3、5、7、10、20、30天分别量取11.0、11.0、4.4 ml的土水混合物测定蔗糖酶、脲酶和过氧化氢酶活性。

1.3 植烟土壤中酶活性的测定方法 土壤酶活性采用比色法和滴定法测定[7-8]。其中蔗糖酶活性采用3，5-二硝基水杨酸比色法测定，脲酶活性采用靛酚蓝比色法测定[9]，过氧化氢酶活性采用高锰酸钾滴定法测定[10]。

2 结果与分析

2.1 盐酸吗啉胍对植烟土壤蔗糖酶活性的影响 由图1可知。各浓度盐酸吗啉胍均能够激活蔗糖酶的活性，并且随着浓度的升高其活性增强。培养1 d后，各浓度盐酸吗啉胍浓度对土壤蔗糖酶都表现出一定的激活作用。在第11天时，激活程度达到最大，添加1.0、10.0、50.0 mg/kg盐酸吗啉胍的土壤蔗糖酶活性分别比对照增加了6.62、8.66、10.37倍。处理后11 d，各浓度处理的激活作用都逐渐减小，到30 d时，蔗糖酶活性恢复到正常水平。

2.2 盐酸吗啉胍对植烟土壤脲酶活性的影响 由图2可知，盐酸吗啉胍对脲酶的活性表现为先激活后抑制的作用。在处理的前7 d所有浓度的盐酸吗啉胍对脲酶均表现出激活作用，随后7～11 d除了1.0 mg/kg盐酸吗啉胍外其他浓度处理均表现出抑制作用，但不同浓度盐酸吗啉胍的抑制作用并无明显规律。11～30 d各浓度均表现出抑制作用，到30 d时，脲酶的活性回归至正常水平。

2.3 盐酸吗啉胍对植烟土壤过氧化氢酶活性的影响 由图3可知，随着培养时间的延长，盐酸吗啉胍表现出抑制（培养

7 d内）→激活（培养7～20 d）→抑制（培养20～30 d）的趋势。试验初期，培养7 d内，各浓度的盐酸吗啉胍对过氧化氢酶的活性均有一定抑制作用，且浓度越高抑制作用越大，但抑制效果比较微小，50.0 mg/kg盐酸吗啉胍的抑制率为5.6%；7～20 d，各浓度的盐酸吗啉胍对过氧化氢酶有激活作用，激活作用的大小与盐酸吗啉胍浓度的高低呈正相关，20～30 d又开始抑制，到30 d时，过氧化氢酶的活性恢复至正常水平。

3 结论

盐酸吗啉胍对土壤中蔗糖酶的影响较大，总体表现为激活作用，并且浓度越高激活作用越明显。

盐酸吗啉胍对土壤脉酶的影响表现为先激活再抑制，1～7 d所有浓度均表现为激活作用，7～11 d除了1.0 mg/kg盐酸吗啉胍外其他浓度处理均表现出抑制作用，不同浓度的盐酸吗啉胍的抑制作用并无明显规律。

盐酸吗啉胍对过氧化氢酶的影响表现为“抑制-激活-抑制”过程，且各浓度的盐酸吗啉胍对过氧化氢酶的影响呈正相关。

参考文献

[1] 周礼恺.土壤酶与植物营养以及与农药的相互效应[J].土壤学进展，1981，9（6）：18-27.

[2] 傅丽君，赵士熙，王海，等.4种农药对土壤微生物呼吸及过氧化氢酶活性的影响[J].福建农林大学学报：自然科学版，2005，34（4）：441-445.

[3] 康军，李征.HPLC法测定盐酸吗啉胍片含量的考察[J].中国医药导报，2011（3）：58-63.

[4] 盛夏.HPLC法测定盐酸吗啉胍滴眼液的含量[J].安徽医药，2011，15（12）：1500-1501.

[5] VESSMAN J.Determination of moroxydine in biological fluids by electron—capture gas chromatography[J].J Chromatogr，1982，229：227-233.

[6] SALEM A A.Modified carbon paste versus graphite coated ion selective electrodes for the determination of amantadine and moroxydine hydrochlorides in pharmaceutical and urine samples[J].Canadian Journal of Analytical Sciences and Spectroscopy，2005，50（3）：147-159.

[7] 龚道新.咪鲜胺及其主要代谢物在水稻田中的行为与效应研究[D].杭州：浙江大学，2005：65-83.

[8] 中科院南京土壤研究所.土壤微生物研究法[M].北京：科学出版社，1985.

[9] 郭明，尹亚梅，何良荣，等.农用化学物质对土壤脲酶活性的影响[J].农业环境保护，2000，19（2）：68-71.

[10] 肖志高，龚道新，施翔，等.咪鲜胺及其制剂和主要代谢物对土壤过氧化氢酶活性的影响[[J].农业环境科学学报，2006，25（3）：728-732.

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