在结核病诊断中应用酶标法和金标法两种方法的效果分析
【摘要】选择结核病患者、非结核性呼吸道疾病患者和健康体检者作为研究对象，分为3个实验小组，分别采用酶标法和金标法这两种方法检测结核抗体，对其阳性率和特异性进行对比。结果显示，在本中心实际所用试剂的条件下，经过实验比较，在结核病诊断中，金标法的标记物较为稳定，存放条件较为便利，操作简便迅速，结果可靠。
【关键词】酶标法;金标法;结核病;体液抗体;细胞免疫
【中图分类号】R446
【文献标识码】B
【文章编号】2095-6851（2019）04-230-01
为了比较酶标法和金标法两种免疫学方法在结核病诊断中的效果差异，本研究选择结核病患者、非结核性呼吸道疾病患者和健康体检者作为研究对象，分为3个实验小组，分别采用这两种方法检测结核抗体，对其阳性率和特异性进行对比。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2016年5月至2018年5月本中心诊治的结核病患者80例作为研究对象，设为a组;选择同期非结核性呼吸道疾病患者80例作为疾病对照，设为b组;选择健康体检人员80例作为对照，设为c组。a组包括男性45例，女35例，年龄18-82岁，平均年龄（55. 83士4. 26）岁，其中肺结核疾病48例，结核性胸膜炎疾病16例，结核性脑膜炎疾病16例。b组包括男42例，女38例，年龄19-83岁，平均年龄（56. 34士3.87）岁，其中肺炎疾病47例，急慢性支气管炎及哮喘疾病15例，肺心病16例，原发性肺癌2例。c组包括男46例，女34例，年龄20一81岁，平均年龄（56. 12士4.08）岁。a、b、c三组研究对象在基础资料方面，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法 对3组研究对象分别采集血样，然后采用金标法和酶标法对血清中的结核抗体实施检测。采用金标法对样本实施检测时，在同样的室温和时间下，由至少2位检验人员通过肉眼对实验结果进行认真观察，尽量避免主观因素对检验结果的影响;采用酶标法实施检测时，实施37℃水浴有效孵育，严格按照规范操作，采用酶联免疫分析仪进行吸光度分析。
1.3 统计学处理 均采用统计学软件SPSS17. 0完成，检测阳性率比较采用x2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
檢测后发现，a组肺结核患者，采用金标法测得的阳性率为75.58%;采用酶标法测定的阳性率为80.46%;对于b组非结核性呼吸道疾病患者，采用金标法测得的阳性率为2. 6%，采用酶标法测定的阳性率为7.04 %;对于c组健康人员，采用金标法测得结果全部表现为阴性，采用酶标法测定的阳性率为3.87%。
3 讨论
体液的免疫学诊断即血清学诊断，通过测定血中的结核抗体，结合其他指标来佐证是否患有结核。酶联法及金标法检测结核抗体均属于血清学诊断的范畴。酶联法的检测原理是抗原或抗体吸附于固相载体，加入被检物和酶结合物反应后，通过酶催化底物显色来检测抗体或抗原。其操作步骤比金标法繁琐，影响因素较多，标本未离心完全、标本被污染等因素可引起假阳性，应尽量避免;同时有些患者（肝硬化、自身免疫性疾病等）体内含有非特异性抗体，在反应过程中具有一定的吸附作用，从而引起假阳性。金标法检测原理是采用现代生物工程技术提纯的结核分枝杆菌特异性的外膜蛋白做抗原，点样于检测板反应孔中硝酸纤维，若滴入的被检血清标本中含有抗外膜蛋白抗体，则会与外膜蛋白抗原相结合，这时加入胶体金颗粒，与抗原抗体复合物相结合。胶体金本身即可显示红色，不需加入底物，减少了操作误差，节省了时间，而且特异度强，敏感度高，但其需肉眼判断结果，需注意主观因素的影响，至少需2人认真观察结果。
本研究在对象的选择方面，涵盖了经临床已确诊的结核患者、非结核性呼吸道疾病患者及健康人员，从而使得研究结果的分析比较更有针对性。对于3组研究对象，分别采用酶标法及金标法检测结核抗体后发现，a组肺结核患者，金标法测得的阳性率为75.58%;采用酶标法测定的阳性率为80.46%;对于b组非结核性呼吸道疾病患者，采用金标法测得的阳性率为2. 6%，采用酶标法测定的阳性率为7.04 %;对于c组健康人员，采用金标法测得结果全部表现为阴性，采用酶标法测定的阳性率为3.87%。
通过分析发现，采用酶标法对患者进行检测，敏感率较金标法略高，但综合非结核性呼吸道疾病患者及健康人员仍然表现出一定的阳性率的情况。从而表明采用此种方法进行诊断，存在一定的概率出现假阳性的情况，可能与人为操作因素，试剂盒不同抗原包被，某些疾病（如类风湿）患者体内含有非特异性抗体引起反应孔本底升高等因素有关。因此在实施临床诊断过程中需要给予高度关注。采用金标法的检测灵敏度略低于酶标法，从而使得特异性相对提高，而且操作简便，出结果迅速，不须特殊仪器，适合于基层医院开展。所以临床在确定诊断结果过程中，需要对患者的临床症状及临床体征加以认真观察，同时结合实验室检测结果，综合其他指标，例如抗酸染色、结核菌涂片镜检、结核菌素试验、胸片检查等全面分析以求最终有效确诊。
综上所述，临床采用金标法进行结核抗体的检测，最终可以获得较高的特异度及敏感性，作为一种快速免疫学诊断方法，临床应用价值较为显著。同酶标法进行比较，金标法的标记物较为稳定，存放条件较为便利，操作简便迅速，无需选择精密仪器进行配合;同时可以将结果获得时间显著缩短，有效减少工作人员劳动强度，最终使临床获得可靠诊断依据，为结核病的临床治疗提供准确参考依据，将结核病对患者带来的危害性有效减少。而采用本中心的酶联试剂对患者进行检测，敏感率相对金标法略高，但存在一定的假阳性率，建议同时结合其他指标例如痰涂片镜检、胸片等全面综合分析。以上研究结果只针对本中心所使用的相关试剂，随着检验试剂质量的不断提高，临床可根据不同检验目的选择不同的检测方法，以期获得更好的临床诊断依据。
参考文献：
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[2] 李常教.946例肺结核患者痰直接涂片镜检结果分析[J].中国卫生检验杂志，2015（8）;1941-1943.