农药残留的酶联免疫分析检测技术研究
摘 要：酶联免疫分析检测技术具有灵敏度高，特异性强以及操作简单等优势，因此，在对农药残留进行检测的过程中，酶联免疫分析检测技术的应用十分广泛。本文将对酶联免疫分析检测技术在农药残留检测中应用的具体内容进行深入的分析探究。
关键词：农药残留；酶联免疫分析检测技术；应用
中图分类号：F767.2 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20171233044
前言
酶联免疫分析检测技术是将免疫技术和现代化测试技术进行融合后产生的新型技术形式，因其较高的灵敏性以及操作性，在许多领域都得到了有效的应用。从20世纪90年代开始，酶联免疫分析检测技术在农药残留检测中得到应用，逐渐成为农业残留检测中不可缺少的技术类型之一。酶联免疫分析检测技术涉及到了多个学科知识的综合应用，农药残留检测技术的发展创新提供了更加广阔的思路。
1 酶联免疫分析检测技术的内涵分析
酶联免疫分析检测技术本质上是免疫技术和现代化检测技术的综合应用，因此其原理基本上就是免疫技术的原理，即抗原和抗体的特异性反应。抗原的特性可以分为免疫原性以及反应原性两种类型，同时拥有上述两种特性的抗原被称作完全抗原，仅仅拥有反应原性的抗原则被称作不完全抗原。而通过对抗原和特异性反应这一原理的应用，人们在免疫分析检测的基础上融合了更加现代化的检测技术之后，研发出了酶联免疫分析检测技术，相对于前者，酶联免疫分析检测技术的检测结果具备较高的精确度。在酶联免疫分析检测技术应用于农药残留检测时，在开始检测之前，必须做好相应的准备工作。准备好检测使用的抗原。需要注意的是，该技术使用的是不完全抗原。农药残留的分子量要远远小于免疫原性物质拥有的分子量，因此，残留的农药根本不足以使机体生成针对农药的抗体。在这样的情况下，必须将残留的农药和大分子载体进行偶联，使其产生免疫原性。对于抗原，必须结合农药的类型有针对性的进行准备；人工合成免疫抗原。人工免疫抗原的合成主要是将不完全抗原放置在特殊的环境下，使其发生偶联反应。对于不同的半抗原活性基团，采取的偶联方法也会存在差异性。由于偶联物会受到酸碱度、离子浓度等因素的影响，因此必须对偶联反应发生的条件进行严格的控制；制备农药抗体。在多克隆抗体制备的过程中，可以选择合适的小型動物作为免疫对象，该制备方法相对而言成本较低，且操作简便。而单克隆抗体的制备虽然在成本方面要稍多，但是抗体的特异性要优于前者。
2 酶联免疫分析检测方法的选择
通过大量的实践证明，酶联免疫分析检测技术的针对性较强，可以根据酶的处理方式对其进行分类，目前，应用最普遍的一种方法是酶联免疫吸附分析法，在应用的过程中，酶的具体作用是对复合物进行标记。酶联免疫分析检测方法主要包括以下几种类型：酶标抗原直接竞争抑制法，在具体应用的过程中，需要使用到固体抗原和经过酶标记之后的已知抗原，将上述两种物质和待测物品以及待测农药的抗原进行均匀的混合，之后将其放置在适宜的环境中进行培育，待测农药和经过酶标记的农药会同时与抗体结合，在上述反应结束之后，就可以对反应物进行分离，接着通过加入酶底物的方式使其出现颜色变化，以此为根据就可以对农药的含量进行精准的掌握；酶标抗体直接竞争抑制法。该方法的作用原理与酶标抗原直接竞争抑制法基本相同，主要的区别在于，添加的物质是被抗原包被的固相载体，在发生反应完成后，可以通过显色反应了解农药残留情况；双抗体夹心法。该方法在应用的过程中，需要使用到两种类型的抗体，分别是抗体包被的载体和经过酶标记的抗体。将上述两种抗体和待测物质进行混合反应，之后将反应物分离之后同样采用显色反应测定其中的抗原含量；间接夹心法。该方法与双抗体夹心法最大的区别就是加入固相抗体的次数为两次，其它操作流程完全相同。
在对酶联免疫分析检测技术进行应用的过程中，对于检测方法的选择需要结合实际情况进行，同时，不同的方法在实施的过程中需要的反应条件也存在一定的差别，因此，为了保障检测的准确性，一定要选择最合适的方法。在选择时，要充分考虑到抗体、抗原、反应条件等内容，通过多次的试验对比，选择最准确的检测结果。此外，对于酶变性的因素也要给予充分的重视，将其浓度控制在合理的范围内，避免其对检测过程造成不利的干扰，保障检测结果的精确性。
3 酶联免疫分析检测技术在农药残留检测中的具体应用分析
使用酶联免疫分析检测技术对农药残留进行检测，可以有效的提升检测的准确性。从20世纪80年代开始，酶联免疫分析检测技术进入农药残留检测领域，经过几十年的发展，该技术已经成为农药残留检测应用最广泛的技术形式。通过大量的实践表明，通过这项技术的应用能够极大的减少分析检测需要使用的时间。在酶联免疫分析检测技术发展的进程中，许多学者都在努力对其进行完善，尤其是在新型抗体的研发中取得了不俗的成绩，使得该技术的应用价值得到了巨大的提高。我国从20世纪90年代开始从事这方面的研究，近些年来，酶联免疫分析检测技术的具体操作方法得到了极大的丰富，其应用范围也在不断扩展。笔者将以食品农药残留检测为例对酶联免疫分析检测技术的应用进行详细的分析阐述。
使用酶联免疫分析检测技术对食品农药残留进行检测的过程中，不需要使用多余的设备。在检测之前，首先要对样品进行适当的处理，使其在水中溶解，这样可以为样品的提取提供一定的方便，同时还能够有效的节省成本的投入。酶联免疫分析检测技术对农药残留的检测可以确定农药残留的量，具体可以精确到pg水平。目前，国内外很多食品的农药残留检测都会使用到酶联免疫分析检测技术。
但是人们需要意识到，酶联免疫分析检测技术同样存在一定的缺陷，在实际应用的过程中，一部分待检测物和残留农药的结构存在密切的关系，在这样的情况下，农药的代谢产物很可能会和农药抗体发生反应，从而对检测的精确度造成一定的影响，导致酶联免疫分析检测技术的可靠性以及灵敏度降低。但是这种反应同样具备一定的积极意义，可以使用抗一种农药的抗体对结构密切相关的代谢产物进行多种农药残留的总量检测。此外，还有学者提出，可以将对多种而结构都具备抗性的抗体和非相关的农药抗体进行混合后应用于多种农药残留的综合分析检测，能够更好的应对实际情况，毕竟当前阶段，农药污染的规律性较差，通过这种方式可以有效的提升农药残留检测的效率。由于现实生活中农药的种类较多，样本的处理方法也存在一定的差异，因此，酶联免疫分析检测技术的影响因素尚不明确，有待进一步研究。
3 结语
酶联免疫分析检测技术虽然具备较高的灵敏度以及较强的特异性，能够极大的提升农药残留检测的精确性，但是其仍旧存在一定的局限性，因此，必须加强对该技术的研究分析，不断对其进行完善，如此才能使其在农药残留检测领域发挥出更大的作用，为人们的食品安全提供保障。
参考文献
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