猪变形杆菌病的研究进展
摘要猪变形杆菌病是由奇异变形杆菌引起的猪的一种细菌性人畜共患传染病。对奇异变形杆菌的特性、猪奇异变形杆菌的临床症状、病理变化、实验室诊断和猪奇异变形杆菌病的综合防治措施等方面进行了综述，以期为规模化猪场对该病的防治提供借鉴。
关键词猪；奇异变形杆菌；诊断；防治
中图分类号S828文献标识码A文章编号0517-6611（2014）12-03578-02
基金项目湖北省农业科技创新中心资助项目（2011620001003）；动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室开放课题（2012ZD156）。
作者简介刘泽文（1969-），男，湖北赤壁人，副研究员，从事畜禽疾病诊断与预防研究。*通讯作者，研究员，从事畜禽传染病研究。
变形杆菌（Proteus vulgaris）是人和动物的寄生菌和病原菌。变形杆菌属于肠杆菌科，包括普通变形杆菌、奇异变形杆菌、莫根变形杆菌、雷极变形杆菌和无恒变形杆菌，其中奇异变形杆菌（Proteus mirabilis，PM）是致病性较为严重的致病菌，广泛分布于人和动物的体表、黏膜及消化道，其产生的毒素可引起中毒，是一种常见的条件性致病菌[1]。当机体免疫力下降时，PM可以感染人和动物，引起发病。我国也有猪[2]、鸡[3]和犊牛[4]发生奇异变形杆菌发病的报道。近年来，奇异变形杆菌病已成为危害我国养猪业的一种新的细菌性传染病[5-6]，由于其还可以引起人类的原发性或继发性感染，造成人类食物中毒。因此，对这种人畜共患新传染病应引起高度重视。
1 奇异变形杆菌的特性
猪奇异变形杆菌属于肠杆菌科、变形杆菌属，是革兰氏阴性细菌，有鞭毛，变形杆菌呈明显的多形性，有球形和丝状形，大小约（0.4～0.6）μm×（1～3）μm，为周身鞭毛菌，运动活泼。该菌对营养要求不高，在固体培养基上呈扩散生长，形成以菌种部位为中心的厚薄交替、同心圆形的层层波状菌苔。在培养基中添加0.1%石碳酸或0.4%硼酸，可以抑制其扩散生长，形成一般的单个菌落。在SS平板上可以形成圆形、扁薄、半透明的菌落[7]。培养物有特殊臭味，在血琼脂平板上有溶血现象。
奇异变形杆菌氧化酶、赖氨酸脱羧酶、吲哚、枸橼酸、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、赖氨酸、鸟氨酸均呈阴性；苯丙氨酸脱氨酶、脲酶、鸟氨酸脱羧酶呈阳性；能发酵葡萄糖，产酸产少量气；不能发酵乳糖和卫矛醇；不能产生靛基质；有动力；能产生H2S；不能分解枸橼酸盐[8]。
2 猪奇异变形杆菌病的临床诊断
2.1 临床症状发病猪食欲废绝，皮肤苍白，被毛粗乱，体温升高，达42 ℃以上，咳嗽，呼吸加快。当体温升高至41 ℃以上时，病猪气喘，呼吸急促，腹式呼吸，犬坐，张口伸舌，肺部听诊，湿性罗音明显。病初偶有呕吐，继而腹泻。水样粪便中有黏液，具有腐败臭味。大多数病猪四肢乏力，步态不稳，腹部皮肤潮红，眼结膜充血，颈下与腹下发绀。重症者鼻孔流出泡沫样黏液。
2.2病理变化病死猪的肺明显肿胀，呈红色肝变，触之坚实，肺的尖叶与心叶弥漫性出血，隔叶有出血斑块，气管和支气管内充以大量白色泡沫样黏液，肺与心包有的与胸膜粘连。肺门淋巴结肿胀，充、出血，横切面湿润，呈大理石样变。胃黏膜溃疡，易脱落，胃底部充、出血。空肠与回肠黏膜有微量出血和溃疡，肠壁增生、肿胀，肠内容物呈灰黄色或黄绿色，附有黏液，且具有特殊气味，小肠黏膜弥慢性出血。 肠系膜淋巴结水肿， 回盲口无出血。
2.3病理组织学变化取病死猪的肺与肠等组织，用10%甲醛固定，石蜡包埋切片，HE染色，显微镜下观察发现肺细支气管周围大量淋巴细胞浸润，其黏膜上皮坏死、脱落。黏膜下层血管充血，并有多量淋巴细胞和少量单核吞噬细胞浸润，肺泡壁充血，肺泡内有渗出的细胞，与单核吞噬白细胞形成含铁血黄素；小肠绒毛上皮坏死、脱落，黏膜层和黏膜下层血管充血，有单核吞噬细胞、嗜酸中性白细胞、酸性白细胞浸润，肠绒毛和肠腺杯状细胞明显扩大；肺门淋巴结、淋巴小结数量增多，明显扩大，生发中心明显，淋巴窦内皮活化，有较多的单核吞噬细胞，淋巴结内血管充血；肾小球血管内皮轻度增生，肾小管上皮颗粒变性或坏死，肾小管腔内有尿圆柱；肝淤血，肝细胞变性。
3 实验室诊断
3.1 细菌分离与鉴定分离细菌可用病猪的胃、小肠、盲肠内容物及结肠黏膜、肠系膜淋巴结、肺脏及肺门淋巴结等。无菌采集病猪病料，分别接种于鲜血琼脂平板和普通肉汤培养基中，将接种的鲜血琼脂平板放置于37 ℃下培养24 h后，可见由细菌接种点向周围迁徙性扩散生长的灰色平铺菌落，且以接种点为中心形成水波纹状圆心圈，覆盖整个平板上；另外，血平板变黑，散发出特殊的腐败性臭味。普通肉汤培养基于37 ℃下培养24 h后呈均匀混浊样，并有气泡产生。培养物经革兰氏染色，油镜观察均可见革兰氏阴性杆菌，大小不等但较为一致，无芽孢和荚膜。分离的细菌接种于麦康凯平板中，没有粉红色菌落形成。
3.2生化鉴定将分离的细菌按照猪奇异变形杆菌的生化特性进行生化试验，应与该菌的生化特性相符合。
3.3动物致病性试验取已培养24 h的肉汤培养物按照0.2 ml/只的剂量腹腔注射试验组小白鼠4 只；对照组4只小白鼠则腹腔注射生理盐水0.2 ml/只。试验组小白鼠在接种肉汤培养物后24～48 h期间相继出现腹泻症状，并陆续全部死亡。对照组小白鼠没有异常表现。取死亡小白鼠的肝脏接种于鲜血琼脂平板中，于37 ℃下培养24 h后可见鲜血琼脂平板上生长有迁徙性扩散的灰色平铺菌落。取该灰色平铺菌落进行革兰氏染色并镜检，可见革兰氏阴性、大小不等的杆菌。对照组的小白鼠的肝脏接种于鲜血琼脂平板中，37 ℃恒温箱培养24 h后没有观察到任何菌落。
3.4奇异变形杆菌的分子生物学检测林红乐等[9]针对编码奇异变形杆菌脲酶调节子的基因序列设计2条PCR引物，扩增片段长度为225 bp，结果发现PCR检测PM的结果与传统培养方法一致，PCR方法较传统培养方法更加快捷，在4 h内即可完成扩增反应，PCR方法敏感度可达30 cfu/ml。苏良等[10]也针对奇异变形杆菌脲酶调节子编码基因特异性序列的6个位点设计4条LAMP引物，建立一种检测奇异变形杆菌快速且特异的环介导等温扩增（LAMP）检测方法，该方法检测奇异变形杆菌的特异性与普通PCR相同，但其敏感性比普通PCR 高10倍，且检测速度更快，在 60 min内即可完成扩增反应。
4猪奇异变形杆菌病的防治措施
虽然该病已经成为危害养猪业较为严重的一种新的细菌性传染病，但其重要性还未引起养猪行业的足够重视，还未研制出有效的疫苗对该病进行预防，因此该病的防治只能从加强饲养管理和进行药物治疗2个方面进行。
4.1饲养管理措施预防该病首先必须加强生物安全管理和改善饲养管理，对环境、饲料、饮水供应等的管理应严格加强，改善猪舍的卫生条件，特别注意通风、保持干燥、防寒及降低饲养密度。在各阶段都尽量实行全进全出，以便猪舍在全部猪出栏后彻底消毒7 d以上。
4.2药物治疗猪变形杆菌容易对临床常用的抗生素产生耐药性。夏修三等[11]对从人体内分离的28株奇异变形杆菌进行了药敏试验，结果表明奇异变形杆菌对一代头孢菌素头孢唑啉耐药率为100%，对二代头孢呋辛的耐药率为51.9%，对氨苄西林的耐药率为73.7%，对诺氟沙星的耐药率为50%。因此在确诊该病病原以后应根据细菌的药敏试验结果选用敏感的抗菌药物进行预防和治疗。对有严重脱水的仔猪则另外加服补液盐水和电解多维溶液。为了预防该病的再次发生，养殖场也可在饲料中添加适量的敏感抗菌药物进行预防。
参考文献
[1] W·A·黑根，D·W·布隆纳尔.家畜传染病[M].7版.北京：农业出版社，1988：83-84.
[2] 曲信芹，穆晓惠，李甜甜.一株致病性奇异变形杆菌的分离与鉴定[J].山东畜牧兽医，2012（4）：15-16.
[3] 潘玉善，苑丽，刘建华，等.鸡大肠杆菌和奇异变形杆菌的分离、鉴定及药敏分析[J].江西农业学报，2009，21（12）：156-159.
[4] 肖定汉，杨通广，李兰华，等.犊牛变形杆菌病[J].中国奶牛，2009（1）：31-32.
[5] 叶树株，黄言钧，张理谋.猪变形杆菌感染症的调查研究[J].畜牧兽医学报，1991，22（1）：74-77.
[6] 吴凌，徐春厚.猪链球菌和变形杆菌混合感染的诊断[J].中国兽医杂志，2003，39（4）：56-57.
[7] 封会茹，董晓根，赵伟，等.变形杆菌菌落计数方法的探讨[J].现代预防医学2008，35（1）：126-129.
[8] 李仲兴，郑家齐，李家宏，等.诊断细菌学[M].香港： 黄河文化出版社，1992：330-331.
[9] 林红乐，文岚，张如胜.PCR快速检测奇异变形杆菌的研究[J].实用预防医学，2009，16（2）：560-562.
[10] 苏良，张如胜，宋克云，等.环介导等温扩增（LAMP）技术检测奇异变形杆菌方法的建立[J].现代预防医学，2010，37（4）：741-743.
[11] 夏修三，宋翠云，金秋平，等.34 株变形杆菌的检出及药物敏感试验结果分析[J].淮海医药，2013， 31（3）：238-239.