曲安奈德对溃疡性直肠炎患者白细胞介素4和高迁移率族蛋白B1的影响观察
[摘要] 目的 探讨曲安奈德对溃疡性直肠炎患者白细胞介素4和高迁移率族蛋白B1的影响。 方法 选择2011年6月～2012年10月四川省南充市中心医院治疗的40例溃疡性直肠炎患者，将其随机分为两组，观察组应用曲安奈德+甲硝唑灌肠，对照组采用甲硝唑灌肠，观察两组治疗后7 d的临床症状缓解情况，并对白细胞介素4和高迁移率族蛋白B1进行检测及对比。 结果 观察组临床症状缓解情况明显好于对照组，观察组治疗后7 d的血清高迁移率族蛋白B1水平[（2.17±0.19）μg/L]低于对照组[（3.36±0.38）μg/L]，白细胞介素4水平[（31.32±3.58）ng/L]高于对照组[（24.75±2.73）ng/L]，差异均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 曲安奈德灌肠可缓解患者临床症状，其可能机制是降低高迁移率族蛋白B1的表达同时上调白细胞介素4的表达，从而起到抗炎性反应的作用。
[关键词] 溃疡性直肠炎；曲安奈德；白细胞介素4；高迁移率族蛋白B1
[中图分类号] R512.62 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）10（c）-0082-03
溃疡性直肠炎是原因不明的直肠黏膜慢性非特异性炎症，属于溃疡性结肠炎的一个亚型。大部分溃疡性结肠炎患者是从直肠开始发病，因此在溃疡性直肠炎发病阶段就开始进行正规治疗，快速控制症状对防止病变发展具有重要意义[1-2]。本研究采用曲安奈德灌肠治疗溃疡性直肠炎，观察其治疗效果，并检测治疗后7 d患者白细胞介素4（interleukin-4，IL-4）和高迁移率族蛋白B1（high mobility group boxlprotein，HMGB1）的表达情况，探讨其可能的作用机制。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2011年6月～2012年10月于四川省南充市中心医院（以下简称“我院”）住院溃疡性直肠炎患者40例，患者诊断符合2006年《亚太地区炎症性肠病处理共识意见》的诊断标准[3]，并经我院伦理委员会讨论通过，患者已被充分告知并签署知情同意书。患者随机分为观察组及对照组，每组各20例。观察组20例患者中，男11例，女9例，年龄（45.2±5.3）岁，平均病程（6.2±0.8）年；对照组男10例，女10例，年龄（45.8±5.4）岁，平均病程（6.1±0.7）年。两组患者在年龄、性别、病程等方面差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。所有人员均排除其他影响血清IL-4和HMGB1水平的其他因素存在。
1.2 治疗方法
观察组采用曲安奈德20 mg，甲硝唑注射液100 mL及生理盐水100 mL保留灌肠，2次/d，连用7 d，对照组则采用甲硝唑注射液100 mL及生理盐水100 mL保留灌肠，2次/d，连用7 d。曲安奈德由浙江仙琚制药股份有限公司生产，生产批号：100820，甲硝唑由四川科伦医药公司生产，生产批号：G101130，治疗观察期内免服影响消化道动力及其他止泻、助消化药。
1.3 疗效评价
参照2007年《对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见》：完全缓解：临床症状消失，经过纤维结肠镜复查肠黏膜大致正常。有效：临床症状基本消失，经结肠镜复查肠黏膜轻度炎症或假息肉形成。无效：经治疗后临床症状、结肠镜及病理检查结果均无改善。总有效=完全缓解+有效。
1.4 检测方法
将患者用药治疗后7 d时晨起的空腹静脉血5 mL采集送检，炎症状态指标包括血清IL-4、HMGB1均采用上海拜力生物科技有限公司的各种酶联免疫分析试剂盒进行检测，严格按照说明书进行操作，使用酶标仪测量OD值，依据标准曲线计算标本含量。
1.5 统计学方法
采用统计软件SPSS 13.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 临床症状缓解情况
观察组完全缓解14例，有效5例，无效1例，对照组完全缓解7例，有效6例，无效7例，临床总疗效观察组显著优于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05），见表1。
2.2 治疗后血清炎症因子水平比较
治疗前两组患者的IL-4及HMGB1水平比较，差异无统计学意义（P > 0.05），治疗后观察组HMGB1水平低于对照组，而IL-4水平则高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05），见表2。
3 讨论
溃疡性直肠炎是一种病因尚不十分清楚的直肠慢性非特异性炎症性疾病，其发病与多种因素有关，促炎细胞因子与抗炎细胞因子之间的平衡失调是其重要的发病机制[4]。近年来许多研究显示HMGB1是局部性和全身性炎症性疾病的一种重要炎症细胞因子[5]，介导多种急慢性炎症性疾病，而IL-4则属于抑炎症细胞因子，主要由T细胞产生，参与体液免疫反应。本实验主要讨论了曲安奈德灌肠治疗溃疡性直肠炎后HMGB1和IL-4表达水平的变化，并对其可能的作用机制作一初步研究。
HMGB1广泛发布于淋巴组织、脑、肝、肺、心、脾等组织细胞中，可通过活化细胞的主动分泌和坏死细胞的被动释放进入细胞外。因HMGB1分泌明显晚于TNF和IL-1，因此HMGB1被认为是一种后期炎症介质[6]。多种研究显示脓毒症患者血清HMGB1水平明显升高，且与多种炎症指标间具有一定的相关性[7]。同时研究发现活动期类风湿关节炎患者及重症胰腺炎患者血清HMGB1水平均高于健康对照组[8]。HMGB1能刺激血管内皮细胞、单核巨噬细胞分泌炎症细胞因子和黏附分子，聚集炎症细胞至损失部位，介导多种急慢性炎症疾病[9]。Qin等[10]研究报道HGMB1通过MAPK p38磷酸化可明显加强内毒素的致炎作用。当使用HGMB1抗体中和HGMB1后可明显改善内毒素诱导的肺部炎症，且体外实验证实HGMB1拮抗剂也能抑制内毒素刺激的巨噬细胞释放HGMB1[11]。本研究证实曲安奈德灌肠治疗后溃疡性直肠炎患者HGMB1的表达明显降低，患者的炎性反应明显减轻，说明HGMB1在溃疡性直肠炎的发生，发展中有着重要作用，通过药物抑制HGMB1的产生和生物活性是治疗溃疡性直肠炎的重要环节。
IL-4是由CD4+T细胞亚群、B细胞和肥大细胞分泌的多效性细胞因子，对淋巴细胞、巨噬细胞的功能起调节作用，能下调TNF-α、IL-1等炎症介质的表达，介导Th2免疫反应[12]。有研究表明Th1和Th2型免疫反应在感染后肠功能紊乱的发生中起了很重要的作用，由于免疫调节紊乱可使肠道动力及感觉功能改变，使肠道功能紊乱[13-14]。既往研究证实溃疡性结肠炎组IL-4水平显著低于肿瘤组和正常组，且受累黏膜显著低于未受累黏膜[15-16]。Van Kampen等[17]的研究也表明IL-4在正常小鼠的肠道中可以独立起前炎症因子的作用。本实验中经曲安奈德灌肠治疗后溃疡性直肠炎患者的IL-4的表达水平明显高于对照组，说明曲安奈德能上调IL-4的分泌而发挥抗炎作用。
曲安奈德是一种强力长效糖皮质激素，具有强大的抗炎和免疫抑制作用。通过保留灌肠，可使药液直达病所，与病变部位充分接触，且病灶局部浓度高，能明显减轻炎症性肠病的炎性反应。本研究发现HGMB1和IL-4参与溃疡性直肠炎的病理生理过程，曲安奈德灌肠可明显减轻溃疡性直肠炎患者的临床症状，其可能机制是通过降低HGMB1的表达同时上调白细胞介素4的表达，有效调节促炎细胞因子与抗炎细胞因子平衡，从而促进肠道黏膜损伤的修复。
[参考文献]
[1] Meier J，Strm A. Current treatment of ulcerative colitis[J]. World J Gastroenteral，2011，17（27）：3024-3212.
[2] Walsh A，Mabee J，Trivedi K. Inflammatorybowel disease[J]. Prim Care，2011，38（3）：415-432.
[3] Ou Yangqin，Rakesh Tandon，KL Goh，et al. CAsia-pacific Consensus on treatment of inflammatory bowl disease [J]. Gastroenterology，2006，11：233-237.
[4] Yao Yuchuan，Wang Leihui，Zhao Jianghua，et al. The efficacy of Bifido enema treatment in ulcerative proctitis [J]. Chinese Journal Microecology，2005，17：37-38.
[5] Yang H，Wang H，Czura CJ，et al. The cytokine activity of HMGB1 [J]. J Leukoc Biol，2005，78（1）：1-8.
[6] Wang H，Bollm O，Zhang M，et al. HMGB1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice [J]. science，1999，285（5425）：248-251.
[7] Karlsson S，Pettila V，Tenhunen J，et al. HMGB1 as a predictor of organ dysfunction and outcome in patients with severe sepsis [J]. In tensive Care Med，2008，34：1046.
[8] Urbonaviciute V，Fumrohr BG，Weber C，et al. Factor masking HGMB1 in human serum and asma [J]. J Leukoc Biol，2007，81：67.
[9] Fiuza C，Bustin M，Talwar S，et al. Inflammation-promotion activity of HMGB1 on human microvascular endothlial cells[J]. Blood，2003，101（7）：2652-2660.
[10] Qin YH，Dai SM，Tang GS，et al. HMGB1 enhances the proinflammatory activity of lipopolysaccharide by promoting the phosphorylation of MAPK p38 through receptor for advanced glycation end products [J]. J Immunol，2009，183（10）：6244.
[11] Ulloa L，Ochani M，Yang H，et al. Ethyl pyrunate prevents lethality in mice with established lethal sepsis and systemic inflammation [J]. Proc Natl Acad Sci USA，2002，99（19）：12351-12356.
[12] Rogy MA，Beinhauer BG，Reinisch W，et al. Clinical protocal：Transfer of Interleukin-4 and Interleukin-10 in patients with severe inflammatory bowel disease of rectum [J]. Human Gene Ther，2000，11（12）：1731.
[13] Gwee KA，Collins SM，Read NW，et al. Increased rectal mucosal expression of interleukin 1βin recently acquired post-infectious irritable bowel syndrome [J]. Gut，2003，52：523-526.
[14] Khan WI，Collins SM. Gut motor function：immunological control in enteric infection and inflammtion [J]. Clin Exp Immunol，2006，143（3）：389-397.
[15] Mittal RD，Bid HK，Ghoshal UC. IL-1 receptor antagonist（IL-1Ra）gene polymorphism in patients with imflammatory bowel disease in india[J]. Scand J Gastroenteral，2005，40（7）：827-831.
[16] 彭洪，林中超，王程颉.IL-4和IL-6在溃疡性直肠炎中的表达及其意义[J].西部医学，2010，12（22）：2271-2273.
[17] Van Kampen C，Gauldie J，Collins SM. Proinflammatory properties of IL-4 in the intestinal microenviroment [J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Prysiol，2005，288（1）：111.
（收稿日期：2013-07-30 本文编辑：卫 轲）