弥漫大B细胞淋巴瘤血浆中sCD40L的检测及意义
【摘要】目的：通过检测弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者血浆中sCD40L的表达水平，探讨sCD40L与DLBCL预后的关系。方法：应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测40例弥漫大B细胞淋巴瘤患者血浆中sCD40L及正常对照20例血浆中sCD40L表达水平。结果：弥漫大B细胞淋巴瘤患者血浆sCD40L水平明显低于对照组 (P<0. 01)；血清LDH升高组血浆sCD40L水平明显低于血清LDH正常组；高危组血浆sCD40L水平比低危组、低中危组和中高危组明显降低 (P 【关键词】sCD40L；弥漫大B细胞淋巴瘤； 【中图分类号】R733.1 【文献标示码】A【文章编号】1673-9795(2012)03(a)-0000-00 The clinical significance of detecting plasma soluble CD40ligand in Diffuse large B-cell lymphoma. YANG Li-juan CUI Wei-fa WANG Zhan-ju FU Jie-ting WANG Zhan-ju Institute of Hematology, The affiliated hospital of Weifang medical university, weifang, 261031, China 【Abstract】Objective: To explore the clinical significance of plasma soluble CD40ligand (sCD40L) with the relation of diffuse large B- cell lymphoma（DLBCL） by testing its level in patients’ plasma. Methods：The levels of sCD40L were tested by ELISA method in plasma of forty cases DLBCL patients and twenty cases of normal healthy people. Results: the plasma sCD40L level in DLBCL patients was lower than that of control group (P<0.01); the plasma sCD40L in the group with high level of serum LDH was lower than that of normal group(P<0.01); and the plasma sCD40L in high risk group was lower than that of low risk , low to moderate and moderate to high risk groups (P 【Key words】soluble CD40ligand; Diffuse large B- cell lymphoma; 弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中一种最常见的病理亚型，属异质性恶性肿瘤，病因复杂，很难预测临床疾病活动及预后。国际预后指数(IPI)是临床上有效预测疗效或复发的指标，但不能完全反应肿瘤的分子生物学标志，两者相结合有助于指导治疗及改善预后。CD40L能够诱导肿瘤细胞的细胞周期阻滞和／或凋亡[1]。sCD40L属CD40L的胞外区具有生物学活性的可溶性分子，研究证实[2]：非霍奇金淋巴瘤者血浆中sCD40L表达降低，与肿瘤的发生发展密切相关，是一个预后不良的指标。本研究通过检测弥漫大B细胞淋巴瘤患者血浆中sCD40L的表达水平，探讨血浆中sCD40L与预后的相关性，为临床诊断治疗DLBCL提供依据。 1 资料与方法 1．1临床资料 选取自2010年1月至2011年1月在潍坊医学院附属医院及潍坊市人民医院血液内科收治的40例DLBCL患者为观察组，全部病例由病理活检、组织学、免疫组化及基因特征证实。其中男22例，女18例，年龄20-64岁，中位年龄36岁。按IPI分低危、低中危、中高危及高危患者分别为8、11、12、9例；Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分别为9、11、12、9例；非生发中心型及生发中心型分别为26及14例。所有患者均无心脏疾病、慢性呼吸系统及肝肾疾病，排除其他的恶性肿瘤，无影响血浆sCD40L指标的因素如感染、溶血等。所有患者均接受正规及系统化疗方案治疗并坚持随访。 1.2治疗方法 所有初治患者根据IPI分级后接受CHOP方案化疗或二线化疗方案。 1.3 疗效评价 参照最新WHO对实体瘤的近期疗效标准：治疗后分为缓解组（PR+CR）及 无效组(SD+PD)。 1.4 标本收集 所有患者入院后及化疗后抽取晨空腹静脉血2ml，置于无任何添加物的试管中，迅速分离出血浆并置于-70℃的冰箱中保存备用。 1.5检测方法 sCD40L试剂盒购自上海生工生物科技有限公司。应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测，严格按照试剂盒说明书进行操作。 1.6 统计学处理 所有数据由SPSS13.0统计学软件进行处理分析，数据用均数标准差（s）表示，两组间的比较用配对资料t检验，多组比较采用方差分析及两两比较q检验，以P<0.05为差异有统计学意义。 2. 结果 2.1 初治组血浆sCD40L水平与正常对照组比较 初治组sCD40L为（0.180.16）μg/L较正常对照组（3.211.48）μg/L明显减低（P<0.01）。 2.2 血浆sCD40L的水平与血清LDH的关系 LDH升高组sCD40L为（0.240.19）μg/L较正常组（1.010.32）μg/L明显减低（P<0.01）。 2.3血浆sCD40L的水平与预后分级的关系 高危组sCD40L为（0.080.06）μg/L较低危组（0.890.37）μg/L、低中危组0.430.13）μg/L、中高危组（0.390.15）μg/L明显减低（P<0.01）。 2.4 血浆sCD40L的水平与临床分期的关系 见表1 3结论 sCD40L是弥漫大B细胞淋巴瘤患者有价值的预后的指标，与IPI结合可于早期筛选出常规治疗预后不良的病倒，有助于指导治疗及改善预后。 4.讨论 NHL具有侵袭性、易播散、远处转移及免疫缺陷的特征，而影响疗效及预后。因此，探索有助于NHL早期判断及预后相关指标意义重大。CD40L属于TNF家族[3] ，CD40L为II型跨膜蛋白，人CD40L的胞浆段结构与TNF-α胞外段结构类似。sCD40L属CD40L的有效成分，是CD40L的胞外区具有生物学活性的可溶性分子，与肿瘤的发病机制有关[4]。研究表明[5] ：CD40L与CD40结合可诱导肿瘤细胞表面Fas的表达，并上调靶细胞Fas的表达，增强Fas介导的凋亡的敏感性，抑制CD40+T肿瘤细胞生长并诱导其凋亡，并且与肿瘤的生物学行为密切相关,故sCD40L的低表达是肿瘤发生、发展及预后的指标。本研究的结果表明sCD40L与其恶性程度及预后相关，是DLBCL预后不良的指标，与系列研究结果相符和。据基因表达特征DLBCL可分为两类：生发中心B细胞样(GC)DLBCL即生发中心型和激活的B细胞样(ABC)DLBCL即非生发中心型。研究发现，GC表达了生发中心B细胞的正常基因，而ABC表达了体外被诱导激活的B细胞的正常基因，且可能转化为浆细胞，故GC类DLBCL患者的预后明显好于ABC类DLBCL患者，与本研究结果相符。我们可以在IPI的基础上，与sCD40L预后指标相结合，建立一个高效的预后模式，对于预后差的患者进行更为积极的治疗，将对指导DLBCL的治疗有极高的价值。 参考文献 [1]Frauwirth KA,Thompson CB．Activation and inhibition of lymphocytes by costimulation [J].J Clin Invest,2002，109(3)：295—299． [2] 任明强，陈琦．非霍奇金淋巴瘤血浆中sCD40L检测及意义[J]．肿瘤防治研究，2009，36(7)：587—588． [3] Karpusas M，Hsu YM，Wang JH，et a1．2 A crystal structure of an extracellular fragment of human CD40 ligand .structure．1995，3(10)：103l一1039． [4]张维红，津浦，曹水，等．CD40／CD40L交联在CD4十T细胞诱导肿瘤细胞凋亡中的机制研究[J]．中国免疫学杂志，2007，23(10)：890—894． [5]Dicker,F Amon P Kater,Tetsuya Fukuda et a1．Fas／Fas-ligand(CDl78)and TRAIL synergistically induce apoptosis of CD40-activated chronic lymphocytic leukemia B ells[J]．Blood，2005，105(8)：3193—3198． 【收稿日期】2011-11-1