500例孕妇地中海贫血筛查与产前诊断分析

报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取汕尾地区2017年1～12月收治的

500例孕妇进行产前地中海贫血筛查， 孕妇均无其他疾病影响检查预后， 且病情稳定、意识清楚， 均为单胎头位产妇， 且无早产史、流产史， 无严重心血管疾病及肢体功能障碍， 排除合并严重肝肾疾病及精神疾病者， 沟通障碍、文盲、不愿配合者， 临床资料不全者。患者年龄21～32岁， 平均年龄（26.5±4.1）岁;孕周12～16周， 平均孕周（14.8±1.1）周。孕妇均自愿参与本次研究， 并签署知情同意书。

1. 2 方法 对孕妇先行血常规检测， 若（MCV≤82 fl或MCH≤27 pg， 则夫妇双方均进行血红蛋白电泳分析， 若双方血红蛋白电泳分析结果均异常， 则需接受地中海贫血基因检测。

获得孕妇同意后， 根据孕妇妊娠周期不同， 对于妊娠<16周孕妇行绒毛穿刺活检， ≥16周者可行脐带血或羊水穿刺， 同时取孕妇外周血2～3 ml， 以复合荧光标记短串联重复序列（STR）法排除穿刺造成的母体组织污染。后以gap-PCR法对α地中海贫血进行基因诊断， 检查常见的三种α珠蛋白基因缺失型（--SEA、-α3.7、-α4.2）， 同时对夫妇双方中至少一方存在突变时采用聚合酶链式反应-反向点杂交法（PCR-RDB）法对采用三种点突变（αCS、αQS、αWS）进行检测。以聚合酶链式反应-反向点杂交（PCR-RDB）法对β地中海贫血基因突变进行检测， 主要包括17种常见基因突变[IVS2-654 （C→T）、-29（A→G）、CD41-42 （-TCTT）、CD71-72（+A）、IVS1-1 （G→T， G→A）、-28 （A→G）、CD31（-C）、CD17（A→T）、CD27-28 （+C）、CD43（G→T）、-32（C→A）、IVSl-5 （G→C）、-30（T→C）等]， 对夫妇双方中至少一方存在突变时， 加用DNA测序诊断， 参考序列为U01317， 范围从β珠蛋白基因5’端加帽位点上游 126 nt至3’端 poly（A）剪切位点下游230 nt， 但不包括 IVS-II-70～626 nt区域。根据产前基因诊断结果对孕妇进行优生咨询、指导， 对产前基因检查为重症地中海贫血胎儿建议引产， 对诊断为血红蛋白H病胎儿告知孕妇及家属详细情况， 由孕妇及家属自行确定胎儿是引产或继续妊娠[2]。

1. 3 观察指标 统计需进行血红蛋白电泳分析的夫妇数量并进一步统计需接地中海贫血基因检测的夫妇数量， 对于地中海贫血孕妇在婴儿出生后进行3～12个月随访， 观察婴儿情况， 并进行血常规检查与产前诊断。

2 结果

2. 1 血常规检查 500对夫妇中， 148对夫妇需做地中海贫血血红蛋白电泳分析筛查， 阳性99例， 其中孕妇55例， 配偶44例。25对夫妇需做地中海贫血基因检测， 其中携带α地中海贫血基因孕妇10例， 配偶10例;携带β地中海贫血基因孕妇7例， 配偶0例;携带β地中海贫血基因孕妇7例， 配偶0例;携带α+β地中海贫血孕妇2例， 配偶0例。同型有10对做产前诊断。

2. 2 基因检测 地中海贫血基因检测显示同型的10对夫妇产前基因检测结果轻度α地中海贫血3对（12%）， 中度α地中海贫血2对（8%）， 重度α地中海贫血5对（20%）。此10对夫妇生产后， 发现胎儿患有血红蛋白H病1例（4%）、正常胎儿4例（16%）。另外15对夫妇产前β基因检测结果正常孕妇6例（24%）、重度β地中海贫血3例（12%）、轻度β地中海贫血4例（16%）、中度β地中海贫血2例（8%）。

2. 3 随访结果统计 对产前基因检测为重度地中海贫血者， 临床建议给予终止妊娠， 8例接受建议诊断1周内给予引产， 其中1例胎儿巴氏水肿胎、重型α地中海贫血[胎儿α珠蛋白基因-（SEA）/纯合缺失， 基因型为-SEA/--SEA]， 2例胎儿轻型β地中海贫血[胎儿β珠蛋白基因IVS-Ⅱ-654（S-T）杂合突变， 基因型为β IVS-Ⅱ-654/βN]， 3例胎儿重型β地中海贫血[胎儿β珠蛋白基因IVS-Ⅱ-654（C-T）纯合突变， 基因型为βIVS-Ⅱ-654/βIVS-Ⅱ-654]， 2例胎儿东南亚型α地中海贫血， 属轻型α地中海贫血[胎儿为α珠蛋白基因-SEA/杂交缺失， 基因型为--（SEA/αα）]， 8例孕妇均已引产。基因检测7例轻度地中海贫血者产后胎儿随访， 绝大多数无明显异常表现， 有1例为中度β地中海贫血， 于医院接受输血治疗。

3 讨论

地中海贫血在我国南方地区属于常见的遗传性疾病， 死亡率较高， 属于遗传性血液病。主要是由于血红蛋白合成中存在基因突变或缺失的现象， 发展为一定的慢性溶血性贫血[3]。

且双方夫妇均携带相同类型的地中海贫血基因， 在一定程度上会造成胎儿重型地中海贫血。胎儿会发生死胎、儿童期死亡， 为家庭带来严重的精神压力。而目前临床仍未有明确的治疗方式， 因此需要积极做好预防措施， 以有效降低临床地中海贫血的发生。

由于地中海贫血为单基因疾病， 故产前诊断主要还是依靠脐血穿刺、绒毛活检、羊水穿刺进行检查， 目前α地中海贫血基因诊断大多可通过gap-PCR法对常见的三种基因缺失类型进行诊断， 但对于点突变型可通过PCR-RDB法进行诊断。大量临床实践表明点突变型血红蛋白H病的贫血情况较基因缺失引起的血红蛋白H病更为严重， 而β地中海贫血主要为核苷酸的插入、缺失、置换所致， 故主要以PCR-RDB法诊断[4-7]。

綜上所述， 汕尾地区孕妇地中海贫血的阳性率较高， 通过健康教育等干预措施使其掌握地中海贫血相关知识， 能提高其主动参与筛查率， 对于控制重型地中海贫血患儿的出生有重要意义。

参考文献

[1] 周祥敏. 平均红细胞体积与平均红细胞血红蛋白联合筛查妊娠孕妇地中海贫血诊断效果分析. 山西医药杂志， 2016， 45（23）：2730-2732.

[2] 黄健云， 莫和国， 商璇， 等. 中山市小榄地区β-地中海贫血产前筛查和产前诊断状况. 广东医学， 2016， 37（11）：1695-1698.

[3] 王逾男. 基于孕妇外周血浆游离胎儿DNA的地中海贫血无创产前基因诊断研究进展. 中国产前诊断杂志（电子版）， 2016， 8（1）：48-53.

[4] 郝颖， 徐晓昕， 徐志勇， 等. 多重连接依赖性探针扩增技术在α地中海贫血产前诊断中的应用. 中华医学遗传学杂志， 2015， 32（5）：683-686.

[5] 李东明， 韦媛， 玉晋武， 等. 13610例孕妇地中海贫血筛查与产前诊断分析. 中国妇幼保健， 2014， 29（15）：2367-2369.

[6] 吴丽芳， 朱智环， 项延包， 等. 温州地区妊娠妇女产前地中海贫血筛查结果分析. 中国卫生检验杂志， 2016（10）：1467-1468.

[7] 刘萍， 黄俊高. 江西赣南地区18704例地中海贫血产前筛查结果分析. 中国现代医生， 2018（6）：16-19.

[收稿日期：2019-01-25]

推荐访问:地中海 产前诊断 贫血 孕妇 筛查